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簡要描述:轉(zhuǎn)基因快速檢測試紙應(yīng)用雙抗體夾心免疫層析的原理,樣本中的抗原在側(cè)向移動的過程中與膠體金標(biāo)記的特異性單克隆抗體 1 結(jié)合,形成抗原-抗體復(fù)合物,繼續(xù)向前方流動和 NC 膜檢測線上特異性單克隆抗體 2 的結(jié)合形成雙抗體夾心復(fù)合物。如果樣本中抗原含量大于 1%,檢測線(T 線)顯紅色,結(jié)果為陽性;反之,檢測線(T 線)不顯色,結(jié)果為陰性。
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【轉(zhuǎn)基因快速檢測試紙檢測原理】
轉(zhuǎn)基因快速檢測試紙應(yīng)用雙抗體夾心免疫層析的原理,樣本中的抗原在側(cè)向移動的過程中與膠體金標(biāo)記的特異性單克隆抗體 1 結(jié)合,形成抗原-抗體復(fù)合物,繼續(xù)向前方流動和 NC 膜檢測線上特異性單克隆抗體 2 的結(jié)合形成雙抗體夾心復(fù)合物。如果樣本中抗原含量大于 1%,檢測線(T 線)顯紅色,結(jié)果為陽性;反之,檢測線(T 線)不顯色,結(jié)果為陰性。
1.【樣品處理】
植物種子:
1.水稻:取 10 粒水稻種子,充分壓碎,轉(zhuǎn)移到做好標(biāo)記的提取管中(注意:充分壓碎能夠提高測試準(zhǔn)確度),加400μl 緩沖液;(濃度比例按照 10 粒種子加 400μl 緩沖液進(jìn)行),充分溶解。
2.玉米:取 2 粒玉米種子,充分壓碎,轉(zhuǎn)移到做好標(biāo)記的提取管中(注意:充分壓碎能夠提高測試準(zhǔn)確度),加800μl 緩沖液;(濃度比例按照 2 粒種子加 800μl 緩沖液進(jìn)行),充分溶解。
3.蓋好提取管的蓋子,用力上下振蕩提取管 20~30 秒,確保樣品與緩沖液充分混勻。靜置等待固體物質(zhì)沉淀在管底
葉片組織:
1. 將植物葉片組織置于一次性組織提取管的蓋子與管身之間,迅速蓋住蓋子,得到圓形葉片組織,用杵將葉片置于提取管底部。用記號筆在管壁做好標(biāo)記。
2. 將杵插入管中,旋轉(zhuǎn)杵碾攪碎葉片,持續(xù)按壓 20-30 秒。
3. 加入 250 μl 緩沖液。
4. 重復(fù)碾碎步驟使樣品與緩沖液充分接觸混合。拿掉杵棒(注意請將杵棒一次性使用,以免不同樣品間交叉污染)。
2.【使用步驟】
測試前請完整閱讀使用說明書,并將試紙和待檢樣本溶液恢復(fù)至常溫。
1、從包裝袋中取出試紙后請盡快使用;
2、將試紙插入提取管中,開始計時;
3、結(jié)果應(yīng)在 10-15 分鐘內(nèi)讀取,其他時間判讀無效。
3.【結(jié)果判斷】
陰性(-):C 線顯色,T 線不顯色(測試線,靠近加樣孔一端);
陽性(+):C 線顯色,T 線顯色肉眼可見(測試線,靠近加樣孔一端),
無效:未出現(xiàn) C 線,可能操作不當(dāng)或試紙已失效。在此情況下,應(yīng)再次仔細(xì)閱讀說明書,并用新的試紙重新測試。
轉(zhuǎn)基因種子檢測試紙使用事項(xiàng)說明】
1、請勿觸摸試紙中央的白色膜面;
2、請勿使用過期的試紙;
3、本公司提供的試劑請勿食用;
4、由于樣本的差異,有的檢測線可能偏淡或顏色偏灰,但只要出現(xiàn)條帶,就可判定為陽性結(jié)果。
5、樣本中的固體雜質(zhì)顆粒可能會導(dǎo)致假陽性結(jié)果,盡量將樣本充分研磨。
6、本試紙用于定性檢測,若對判斷結(jié)果有疑問,請用其他定量方法做進(jìn)一步確認(rèn)。
【轉(zhuǎn)基因種子檢測試紙儲存及有效期】
轉(zhuǎn)基因檢測試紙檢原包裝在 4-25 ℃陰涼避光干燥處儲存,切勿冷凍,有效期為 12 個月,批號和有效期見外包裝盒。
【產(chǎn)品編號】
規(guī)格:100份/盒
檢測樣本:種子/葉片
靈敏度:1%
檢測時間:5分鐘
有效期:12個月
儲存條件:4℃~30℃避光保存,切勿冷凍。
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